基因芯片技術知識概要
生物芯片,簡單地說就是在一塊指甲大小(1cm3)的有多聚賴氨酸包被的硅片上或其它固相支持物(如玻璃片、硅片、聚丙烯膜、硝酸纖維素膜、尼龍膜等,但需經(jīng)特殊處理。作原位合成的支持物在聚合反應前要先使其表面衍生出羥基或氨基(視所要固定的分子為核酸或寡肽而定)并與保護基建立共價連接;作點樣用的支持物為使其表面帶上正電荷以吸附帶負電荷的探針分子,通常需包被以氨基硅烷或多聚賴氨酸等)將生物分子探針(寡核苷酸片段或基因片段)以大規(guī)模陣列的形式排布,形成可與目的分子(如基因)相互作用,交行反應的固相表面,在激光的順序激發(fā)下標記熒光根據(jù)實際反應情況分別呈現(xiàn)不同的熒光發(fā)射譜征,CCD相機或激光共聚焦顯微鏡根據(jù)其波長及波幅特征收集信號,作出比較和檢測,從而迅速得出所要的信息。生物芯片包括基因芯片、蛋白質(zhì)芯片、組織芯片。而基因芯片中,zui成功的是DNA芯片,即將無數(shù)預先設計好的寡核苷酸或cDNA在芯片上做成點陣,與樣品中同源核酸分子雜交的芯片。
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